R&D

琥珀研发

由琥珀生物技术公司提供。
揭开了琥珀研究的历史及其成果的面纱。

近藤圭司
Amber 生物技术有限公司兼职董事。

世界上关于琥珀的作用和原理的科学论证少之又少。

琥珀生物技术公司以完全 "挑战未知 "的姿态开始了琥珀研究历史的征程，如今已获得了大量有关琥珀的研究成果和知识。琥珀的第一项基础研究工作是琥珀粉的开发。我们开发了一种新的琥珀研磨技术，使粉末比俄罗斯用于琥珀治疗的粉末更细。我们成功地生产出了更细、更光滑的粉末，可用于化妆品。2005 年，这种粉末作为 KOHAKU POWDER® (PD)获得了 "化妆品和天然色素防褪色 "专利（专利号：3725848；专利号：3741429）。与日本国立理化学研究所（现为理化学研究所）共同开展的琥珀研究，为大大加快活性成分的提取和提炼研究提供了契机。

我们进行了大量的试验，以找出我们可以提取什么、在什么温度下提取以及浸泡多长时间。

在使用琥珀粉末微粒提取精华时，我们经历了大量的失败和修改，最终首次发现了有助于创造美丽肌肤的 "促进皮肤新陈代谢效果（2008 年）"和 "促进透明质酸生成效果（2009 年）"。由于这些功效，我们于 2012 年获得了 Kohaku Extract® Repair (RE) 专利（专利号：4953204；专利号：4953203）。我们还通过不同的提取方法发现了生发效果（2010 年）和美白效果（2011 年），并于 2015 年成功申请了专利，分别为 Kohaku Extract® Grow (GR) 和 Kohaku Extract® White (WH)（专利号：5858561，专利号：5858562）。

它作为一种有可能产生新的生理活性的材料而备受关注。

琥珀生物技术公司于 2017 年在筑波大学内建立了一个中心实验室，作为筑波大学的一项事业，继续探索琥珀的未知潜力，包括其保健和美容功效。据报道，植物中含有的物质具有许多有用的生理活性。琥珀含有植物树脂化石过程中产生的未知成分，有望成为一种具有多种可能性的材料。我们在文章和出版物中发表了许多关于琥珀发现的研究成果，其中一篇发表在 2013 年《日本美容皮肤学会杂志》上的论文获得了最佳论文奖。与产业界和学术界合作开展的不懈研究，以及研究人员的热情支持，正在逐步但肯定地揭开琥珀的神秘面纱。

研究人员透露。
琥珀提取物用于保健和食品
琥珀提取物的美容功效

食品用琥珀提取物

Chapter.1.

促进脂肪分解作用

抑制脂肪堆积

01

外表并不能说明一切。
内脏脂肪 "增加。

内脏脂肪储存着我们日常活动所需的能量。因此，如果我们不消耗能量或摄入过多能量，脂肪量就会增加。

内脏脂肪的增加也会增加血液中的中性脂肪含量，这往往会降低高密度脂蛋白（好的）胆固醇，增加低密度脂蛋白（坏的）胆固醇；低密度脂蛋白（坏的）胆固醇的增加会对人体产生各种负面影响，使人体更容易患动脉粥样硬化和心肌梗塞等疾病。内脏脂肪主要存在于肠道周围。内脏脂肪往往主要堆积在肠道周围，但从体外看不到，因此在日常生活中要注意预防。

02

食物琥珀提取物的脂肪分解机制和功能。

脂肪分解的机制

用于食品的琥珀提取物有
有效时

人体内的脂肪会被脂肪分解酶分解。分解后的脂肪碎片被燃烧，成为能量。

03

在细胞实验中。
琥珀提取物对脂肪积累的抑制作用。

考试
方法
用食品级琥珀提取物喂养小鼠的成熟脂肪细胞（已分化的 3T3-L1 细胞）并培养 96 小时。

(A) MTT 法检测食品级琥珀提取物的细胞活力。

结果
研究发现，高达 50 µg/mL 的食品级琥珀提取物干固体对细胞活力没有影响。

(b) 多聚甲醛固定后，细胞中的脂肪滴被油红 O 染成红色。

结果
食物中的琥珀提取物越多，发现的红色区域越多=脂肪滴越少。

(C) 将用（B）染色的细胞溶解在异丙醇中、
在 490 纳米波长下测量脂肪滴中的三酰甘油（甘油三酯）。

结果
研究发现，脂肪滴中的三酰甘油随着食物琥珀提取物喂养量的增加而减少。

当用食品级琥珀提取物培养成熟的培养脂肪细胞时，发现与未培养的脂肪细胞相比，脂肪细胞中储存的中性脂肪量减少了。

改编自 Sogo 等人，《分子》第 26 卷，4630 期，2021 年。
Chapter.2.

对葡萄糖代谢的影响

食品用琥珀提取物。
减少糖分吸收 "效应

01

摄入过多的糖分有什么害处？

我们通过饮食摄入碳水化合物。碳水化合物在体内消化后，会分解成葡萄糖，进入血液。血液中葡萄糖的浓度称为 "血糖"。正常情况下，人体通过分泌荷尔蒙来调节血糖水平。但是，如果饮食不均衡，过量摄入碳水化合物、酒精和甜食，荷尔蒙的分泌就会跟不上，从而出现 "高血糖 "状态。长期高血糖会导致糖尿病，进而增加对身体产生其他各种负面影响的可能性。

02

糖的吸收机制和
食品级琥珀提取物如何发挥作用。

糖的吸收机制

食品用琥珀提取物
吸收机制

食品级琥珀提取物的作用是阻止碳水化合物分解酶的生成量超过需要量（第 1 组），而碳水化合物分解成葡萄糖需要这些酶。这种两阶段的抑制作用会减少进入血液并被人体吸收的葡萄糖量。未被吸收的葡萄糖随后被排出体外。

食品级琥珀提取物的作用是阻止碳水化合物分解酶的生成量超过需要量（第 1 组），而碳水化合物分解成葡萄糖需要这些酶。这种两阶段的抑制作用会减少进入血液并被人体吸收的葡萄糖量。未被吸收的葡萄糖随后被排出体外。

03

细胞实验中用于食品的琥珀提取物。
双重阻断效果

A
抑制糖降解

考试
方法
用食品级琥珀提取物喂养人结肠癌衍生细胞（Caco-2 细胞）并培养 8 天
⇒ 溶解细胞，是一种碳水化合物降解酶

通过 Western 印迹法检测蔗糖酶-异麦芽糖酶复合体蛋白（以下简称 SI 蛋白）。同样，β-肌动蛋白也作为内标进行检测。

结果
膳食中摄入的碳水化合物在小肠中由 SI 蛋白转化为葡萄糖，并被吸收入血。与未摄入食品级琥珀提取物的人相比，摄入食品级琥珀提取物的人体内 SI 蛋白的表达受到抑制。这表明食品级琥珀提取物有望通过抑制碳水化合物降解酶的作用来减少糖的吸收。摘自第 6599592 号专利。

B
抑制糖分吸收

考试
方法

在 Transwell 膜过滤器上培养人结肠癌衍生细胞（Caco-2 细胞）3 周。(正常情况下，0.4 微米孔径的膜过滤器允许葡萄糖通过）。

细胞间电阻大于 350 Ω-cm2。*

在上层加入葡萄糖和食物琥珀提取物，培养 2 小时。然后测量转移到下层的葡萄糖量。
再次确认细胞间电阻高于 350 Ω-cm2。

结果

研究发现，肠道中有一些膜蛋白会选择性地渗透葡萄糖。研究发现，含有较多食品级琥珀提取物的细胞对葡萄糖的渗透性较低。根据第 6601860 号专利示例绘制。*细胞间电阻是检查 Caco-2 细胞是否紧密结合在一起的指南；50 Ω-cm2 或更高，则认为它们紧密结合并形成屏障。
Chapter.3.

对血压调节的影响

食品用琥珀提取物。
正常血压 "效应

01

日本人
高血压 "是如何产生的？

血压由自律神经系统（交感神经和副交感神经）控制。自律神经系统（交感神经）系统会做出 "紧急反应"，保护身体不受外敌侵袭，使身体处于随时准备战斗或逃跑的状态，当身体受到巨大压力时也会做出同样的反应。

精神和身体压力越大，自律神经系统（交感神经）就越活跃，从而加快心率。这意味着心脏泵出更多的血液，从而导致 "高血压"。此外，摄入过多的盐和过量饮酒也会导致血压升高。

02

血压升高和
食品级琥珀提取物如何发挥作用。

血压升高的机制

食品用琥珀提取物
作用机理

精神和身体上的压力会激活血管紧张素转换酶（ACE），导致血压升高*1，从而试图收缩血管。食品用琥珀提取物对血管紧张素转换酶起作用，抑制其活化，从而降低血压升高。

1 事实上，ACE 激活产生的物质会收缩血管。

03

细胞实验中用于食品的琥珀提取物。
抑制血压升高的作用

考试
方法
使用血管紧张素 I 转换酶（ACE）抑制活性测定试剂盒（Dojin Chemical）进行测定。将 10 毫克食品级琥珀提取物（干固体）溶于 1 毫升二甲基亚砜中，离心后取上清液作为储备液。该溶液用纯水稀释 5 倍。在这些样品中加入底物和酶，并对反应产生的物质进行定量。

结论
研究发现，随着琥珀提取物浓度的增加，对血管紧张素转换酶（ACE）活性的抑制率也随之增加。研究认为，琥珀提取物有潜力应用于食品和其他产品，以降低血压升高。摘自第 6548797 号专利的实例。

琥珀提取物

Chapter.1.

由 Kohaku Extract® Repair (RE) 提供。
表皮和角质层的老化护理

促进皮肤新陈代谢的功效（专利号：4953204）。琥珀提取物®修复剂（RE）是一种
促进皮肤正常更新、
抚平粗糙的皮肤
产生美肤效果。

促进新陈代谢的基因数量。

考试
方法
将正常人表皮角质细胞（NHEK）用光乐提取物修复剂（RE）培养 24 小时后，收集总 RNA，采用 RT 反应→实时 PCR 方法测定促进新陈代谢的基因（HB-EGF）*的含量。*什么是 HB-EGF：。
肝素结合表皮生长因子样生长因子，即肝素结合表皮生长因子。它是一种参与皮肤伤口愈合的生长因子。

结果

打造光滑肌肤
促进皮肤更新

与未添加琥珀提取物修复剂（RE）的细胞相比，添加了琥珀提取物修复剂（RE）的细胞中HB-EGF基因的数量有所增加。这表明，琥珀提取物可望有效地使因衰老而趋于延迟的新陈代谢率恢复正常。摘自 Ohara 等人，《化妆品科学杂志》，34.89-101，2010 年。

促进透明质酸生成的效果（专利号 4953203）。琥珀提取物®修复剂（RE）是一种
增加皮肤含水量
它能让皮肤变得清爽饱满。

透明质酸生成酶基因的数量。

考试
方法
将人类永生表皮角质细胞（HaCaT 细胞）与琥珀酸提取物修复（RE）细胞培养 24 小时，收集总 RNA，采用 RT 反应→实时 PCR 方法测定透明质酸生成酶 3（HAS3）基因的含量。

结果

清新肌肤
增加皮肤水分

与未使用琥珀提取物修复剂（RE）的细胞相比，使用琥珀提取物修复剂（RE）处理的细胞中负责表皮角质细胞产生透明质酸的透明质酸生成酶 3 的基因水平有所提高。这表明琥珀酸提取物有望帮助皮肤产生透明质酸，并提高其自身的保湿能力。根据 Ohara 等人的文章编译，《化妆品协会杂志》34.89-101，2010 年。

透明质酸的染色图像。

考试
方法
将人体皮肤重建培养模型*）（以下简称皮肤模型）与最终浓度为 25 µg/mL 的琥珀酸提取物修复液（RE）一起培养 40 小时。然后用多聚甲醛和戊二醛固定组织，并用透明质酸染成棕色。*人体皮肤重建模型。
皮肤从上到下由三层组成：角质层、表皮层和真皮层。它再现了人体皮肤组织的功能，尽管程度有限。

透明质酸的染色图像。

结果
与未使用琥珀酰提取物修复剂（RE）的皮肤模型相比，使用琥珀酰提取物修复剂（RE）处理的皮肤模型呈现出更深的棕色，尤其是在表皮层，即产生了更多的透明质酸。根据 Ohara 等人的文章编译，《化妆品协会杂志》34.89-101，2010 年。
Chapter.2.

Succinyl Extract® Grow (GR)。
生发高峰

增加血管内皮生长因子基因的效果（专利号：5858561）。含 Succinyl Extract® Grow (GR)。
通过加工
血管内皮生长因子基因增加。

考试
方法
用琥珀酸提取物生长细胞（GR）培养人类永生表皮角质细胞（HaCaT 细胞）24 小时，收集总 RNA，并通过 RT 反应→实时 PCR 方法测定促进血管生成的生长因子（VEGFA）基因的数量。

结果
研究发现，使用琥珀酸提取物生长素（GR）治疗可增加血管内皮生长因子（VEGFA）基因。这将促进毛囊周围的血液循环，从而使头发更浓密、更有活力。佐藤等人（与国立理化研究所（现理化学研究所）合作进行的基础研究），根据《日本美容皮肤科杂志》2013 年第 23 期第 289-300 页。
Chapter.3.

Kohaku Extract® White (WH)。
美肤效果

抑制黑色素生成的作用（专利号：5858562）。用于琥珀酸提取物®白色（WH）、
黑色素生成减少
它能有效消除皮肤瑕疵。

培养的人类表皮角质细胞。
内皮素-1 基因。

考试
方法
用紫外线照射培养的人类永生表皮角质细胞（HaCaT 细胞），然后给予琥珀酸提取物白蛋白并进一步培养 24 小时，然后收集总 RNA，采用 RT 反应 → 实时 PCR 方法测定内皮素-1 的基因表达。

结果

让肌肤清透无瑕。

研究发现，与不喂食琥珀提取物白的人相比，喂食琥珀提取物白的人体内炎症肽内皮素-1的基因表达受到抑制。这表明，琥珀提取物白有望通过抑制内皮素-1来预防色斑，而内皮素-1会将炎症（色斑的根源）传递给黑色素细胞。专利号：5656582，根据内部数据起草。